本文目录索引 1,怎样检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质? 2,怎样检测生物组织中的糖类,脂肪和蛋白质 3,怎样检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质? 4,检测生物组织中的糖类、脂肪、蛋白质的实验步骤 5,检测生物组织中的糖类,脂肪,蛋白质应注意哪些
本文目录索引
- 1,怎样检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质?
- 2,怎样检测生物组织中的糖类,脂肪和蛋白质
- 3,怎样检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质?
- 4,检测生物组织中的糖类、脂肪、蛋白质的实验步骤
- 5,检测生物组织中的糖类,脂肪,蛋白质应注意哪些事项
- 6,如何检测生物组织中的糖类,脂肪,和蛋白质
1,怎样检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质?
苏丹黑及油红O等。脂肪被染色,实际上是苏丹染料被脂肪溶解吸附而呈现染料的颜色。经研究认为组织中脂质在液态或半液态时,对苏丹染料着色效果最好。根据这一原理,适当提高温度(37℃-60℃)对组织切片染色效果是有好处的。 脂类染色,用冰冻或石蜡切片,以水溶性封固剂封固,如甘油、明胶和阿拉伯糖胶等。 脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色或橙红色(或被苏丹Ⅳ染液染成红色),胆脂素呈淡红色,脂肪酸不着色,细胞核呈蓝色。 苏丹Ⅲ染色液染色:脂肪呈橙红,胞核呈兰色 3. 蛋白质与双缩脲试剂发生作用,产生紫色反应。(蛋白质分子中含有很多肽键,在碱性NaOH溶液中能与双缩脲试剂中的Cu2+作用,产生紫色反应。) 2/6 三.实验材料 1.做可溶性还原性糖鉴定实验,如苹果、梨。(因为组织的颜色较浅,易于观察。)经试验比较,颜色反应的明显程度依次为苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜。 2要浸泡3~4小时(也可用蓖麻种子)。 3.做蛋白质的鉴定实验,可用富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清。 4.淀粉的鉴定:马铃薯匀浆。 四、实验试剂 1.斐林试剂(包括甲液:质量浓度为0.1g/ mL NaOH溶液和乙液:质量浓度为0.05g/ mL CuSO4溶液) 2.苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液 3.双缩脲试剂(包括A液:质量浓度为0.1g/ mL NaOH溶液和B液:质量浓度为0.01g/ mL CuSO4溶液) 4.体积分数为50%的酒精溶液 5.碘液 6.蒸馏水。 3/6
2,怎样检测生物组织中的糖类,脂肪和蛋白质
糖类中还原糖(例葡萄糖、果糖、麦芽糖等)可用斐林试剂检测。先准备组织样液,再准备0·1g/ml的氢氧化钠溶液、0.05g/ml硫酸铜溶液。方法步骤:1.(1)取2ml组织样液加入1支洁净的试管。 (2)再另取2支试管,分别加入2mlNaOH与硫酸铜溶液,再把硫酸铜溶液倒入氢氧化钠溶液的试管,振荡混合均匀,即为斐林试剂。 (3)把新配制的斐林试剂与组织样液,等体积混合,振荡摇匀,然后放入50~60度水浴中保温,观察颜色变化。如出现砖红色沉淀,即说明有还原糖。 非还原糖(淀粉用碘液检测即可)碘遇淀粉变蓝。 脂肪用苏丹三或苏丹四检测,材料可用浸泡过"的花生种子,先制成临时装片,再用显微镜观察。或者把试剂滴加到组织样液中,观察颜色变化。 临时装片制作:用刀片先在花子叶切开,然后做徒手切片,放在清水中,然后用毛笔蘸取最薄的一片放在载玻片中央,滴加苏丹三溶液染色3到5分钟,用吸水纸吸取多余染液,再用体积分数为50%酒精洗去浮色,盖上盖玻片。放在显微镜下观察。脂肪粒被苏丹三染成橘黄色、苏丹四染成红色。(上述徒手切片做不好,可在花生子叶上 刮取少量粉末,直接涂在载玻片上来替代。 蛋白质用双缩脲试剂来检测。双缩脲是由A液(0.1g/ml的氢氧化钠)、B液(O.01g/mL的硫酸铜溶液组成。) 使用时取组织样液(用蛋清稀释液或豆浆)一2mL加入洁净试管,然后先滴加1mLA液,振荡试管摇匀,再滴加3~4滴硫酸铜溶液,摇匀。蛋白质遇双缩脲生成紫色。
3,怎样检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质?
某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物,产生特定的颜色反应。 1、生物组织中普遍存在的可溶性糖类较多,有葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖。前三种糖的分子内都含有游离的具还原性的半缩醛羟基,因此叫做还原糖;蔗糖分子内没有,为非还原糖。实验中所用的斐林试剂,只能鉴定生物组织中可溶性还原糖,而不能鉴定可溶性非还原糖。 可溶性还原糖(如葡萄糖、果糖、麦芽糖)与斐林试剂发生作用,可生成砖红色的Cu 2O沉淀。如: 葡萄糖 + 2Cu2+ + 4OH- 加热 葡萄糖酸 + Cu 2O↓(砖红色)+ H 2O 即Cu 2+被还原成Cu 2O,葡萄糖被氧化成葡萄糖酸。 用斐林试剂鉴定还原糖时,溶液变化过程为:浅蓝色→棕色→砖红色沉淀 淀粉遇碘变蓝色(直链)或紫(红)色(支链)。 2、脂肪和类脂(磷脂、糖脂、固醇脂等)统称为脂类。它是构成人体组织的正常成分,不溶于水而易溶于酒精、乙醚、氯仿等脂溶剂中。在化学组成上,脂类属于脂肪酸的酯或与这些酯有关的物质。脂类的主要功能是氧化供能。 脂肪主要存积于脂肪组织中,并以油滴状的微粒存在脂肪细胞浆内。 在病理检验中,脂类染色法最常用以证明脂肪变性,脂肪栓子以及肿瘤的鉴别。脂类染色使用最广泛的染料是苏丹染料,最常用的有苏丹Ⅲ,苏丹Ⅳ,苏丹黑及油红O等。脂肪被染色,实际上是苏丹染料被脂肪溶解吸附而呈现染料的颜色。经研究认为组织中脂质在液态或半液态时,对苏丹染料着色效果最好。根据这一原理,适当提高温度(37℃-60℃)对组织切片染色效果是有好处的。 脂类染色,用冰冻或石蜡切片,以水溶性封固剂封固,如甘油、明胶和阿拉伯糖胶等。[来源:学|科|网Z|X|X|K] 脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色或橙红色(或被苏丹Ⅳ染液染成红色),胆脂素呈淡红色,脂肪酸不着色,细胞核呈蓝色。 3、蛋白质与双缩脲试剂发生作用,产生紫色反应。(蛋白质分子中含有很多肽键,在碱性NaOH溶液中能与双缩脲试剂中的Cu2+作用,产生紫色反应。)
4,检测生物组织中的糖类、脂肪、蛋白质的实验步骤
实验原理
葡萄糖、果糖、麦芽糖的分子内含有还原性基团(游离醛基或游离酮基),因此叫还原糖。蔗糖则是非还原性糖,不具有还原性。可溶性还原糖与斐林试剂发生作用,可以生成砖红色沉淀。斐林试剂实际是Cu2+的碱性溶液,能使具有游离醛基或游离酮基的糖氧化,Cu2+则被还原成砖红色沉淀
实验步骤
1)向试管中加入2毫升组织液
2)向试管中加入1毫升斐林试剂(现配现用)
3)将试管放入盛有50-65度的温水的大烧杯中,加热两分钟。
还原糖-斐林试剂-棕色-砖红色
5,检测生物组织中的糖类,脂肪,蛋白质应注意哪些事项
注意事项:
检测可溶性还原糖:
1、选材要用含糖较高、颜色为白色或近于白色的植物组织
2、斐林试剂不稳定,一般配制成甲液(NaOH:0.01 g/ml)和乙液(CuSO4:0.05 g/ml)来保存,用时必须将甲、乙两液混合均匀后使用,切勿分别加入组织样液中进行检测。
检测脂肪:
1、切片要尽可能的薄;
2、染色后一定要用50%的酒精溶液洗去浮色;
3、观察时找最薄处,最好只有1~2层细胞
检测蛋白质:
1、用鸡蛋蛋白时,一定要加以稀释,如果稀释不够,与双缩脲试剂发生反应后会粘固在试管内壁上,使反应不彻底,且试管不易洗干净;
2、双缩脲试剂使用时,应先加A造成碱性环境,再加B。
6,如何检测生物组织中的糖类,脂肪,和蛋白质
原理:某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。糖类中的还原糖(如葡萄糖、果糖),与斐林试剂发生作用,可以生成砖红色沉淀。脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色(或被苏丹Ⅳ染液染成红色)。蛋白质与双缩脲试剂发生作用,可以产生紫色反应。淀粉遇碘变蓝色。因此,可以根据与某些化学试剂所产生的颜色反应,检测生物组织中糖类、脂肪或蛋白质的存在。操作指南 1.材料 苹果或梨匀浆,马铃薯匀浆,花生种子(实验前浸泡3~4 h)及其匀浆,鸡蛋清(稀释10倍后使用),鲜肝提取液,质量分数为1%的葡萄糖溶液,食用油,豆浆,质量分数为1%的淀粉溶液。 2.用具 双面刀片,毛笔,培养皿,载玻片,盖玻片,显微镜,吸水纸,滴管,试管,试管架,试管夹,大、小烧杯,小量筒,三脚架,石棉网,火柴。 3.试剂 (1)斐林试剂甲液:质量浓度为0.1 g/mL的NaOH溶液。乙液:质量浓度为0.05 g/mL的CuSO4溶液。 (2)苏丹Ⅲ染液称取0.1 g苏丹Ⅲ干粉,溶于100 mL体积分数为95%的酒精溶液中,待全部溶解后使用。 苏丹Ⅳ染液称取0.1 g苏丹Ⅳ干粉,溶于50 mL丙酮中,再加入体积分数为70%的酒精溶液50 mL,充分混合后即可使用。 (3)双缩脲试剂A液:质量浓度为0.1 g/mL的NaOH溶液(10 g NaOH加水至100 mL)。B液:质量浓度为0.01 g/mL的CuSO4溶液(1 g CuSO4加水至100 mL)。 (4)此外还有碘液,体积分数为50%的酒精溶液,蒸馏水。 4.操作要点 (1)观察并记录各种试剂与相关物质反应产生的实验现象,具体操作参见步骤(3)~(7)。 ...
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