为什么书上说凝胶色谱柱中凝胶小孔的直径对分离效果无影响?,为什么酵母细胞固定实验中有的凝胶珠有气泡?,护士挂吊水时,有较多气泡注入患者体内,气泡是否能自行排出...
为什么书上说凝胶色谱柱中凝胶小孔的直径对分离效果无影响?
凝胶小孔的直径一定会对分离效果有影响。
当含有大小不同的蛋白质样品加到凝胶柱上时,比凝胶珠平均孔径小的蛋白质就要连续不断地穿入珠子的内部,这样的小分子不但其运动路程长,而且受到来自凝胶珠内部的阻力也很大,所以越小的蛋白质,把它们从柱子上洗脱下来所花费的时间越长!凝胶中只有很少的孔径可接受大的蛋白。因此,大的蛋白质直接通过凝胶珠之间的缝隙首先被洗脱下来。凝胶过滤所用的凝胶孔径大小的选择主要取决于要纯化的蛋白质分子量。
为什么酵母细胞固定实验中有的凝胶珠有气泡?
稀一点的容易滴下,略有粘滞,形成球状,可能带细丝尾巴。
稠了跟鼻涕一样在操作时很不方便,影响品质的因素:
高浓度海藻酸钠混合菌液麻烦,要多搅拌。多搅拌后又带入气泡,气泡裹在高浓度海藻酸钠,根本去不掉,在注射时影响凝胶珠品质。
高浓度海藻酸钠只能用粗针头注射,针头粗也会粘着,难促使形成液滴。
当然,主要原因是高浓度海藻酸钠不易形成滴状下落,形成条状,品相极差。
浓度高海藻酸钠形成的凝胶珠比浓度低海藻酸钠的大。(稀的容易滴下)
滴下后不易形成凝胶珠的原因:
CaCl2溶液要求比刚好的浓度略高一些。
CaCl2相对于高浓度海藻酸钠钠太稀,海藻酸钠不能及时定形。
护士挂吊水时,有较多气泡注入患者体内,气泡是否能自行排出
在气泡沿滴管而下时,用手指弹滴管,可以使气泡上升到中间那个小瓶子里而不产生危害。如果空气注入血液,会随血液参与血液循环,随针头注射的静脉进入上下腔静脉,到心脏的右心房、右心室,再经肺动脉到肺部毛细血管网,空气在此时减少了毛细血管与肺部组织的物质交换,若此时空气不能渗透到肺泡外,那么又要被带入血管重新走一遭,在毛细血管与全身组织的物质交换处会导致细胞供血不足,引起一系列反映。注入的空气越多反应越厉害。10毫升就可以害死一个人了。
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